El glifosato o la N- (fosfonometil) glicina es el herbicida de amplio espectro y desecante de cultivos más ampliamente utilizado en el mundo, y representa aproximadamente el 25 por ciento del mercado mundial de herbicidas.

Un compuesto organofosporoso (fosfonato), se descubrió por primera vez como un herbicida por Monsanto y se introdujo en el mercado en 1974 bajo el nombre comercial "Roundup". El glifosato se aplica a veces en cebada, trigo y otros cultivos como un agente de secado previo a la cosecha para acelerar las operaciones de cosecha.

Si bien las formulaciones de glifosato como Roundup han sido aprobadas por organismos reguladores de todo el mundo, persisten las preocupaciones sobre sus efectos en los seres humanos y el medio ambiente. Los hallazgos contradictorios sobre los riesgos carcinogénicos han llevado al glifosato al centro de la disputa entre políticos, reguladores e investigadores de la UE y de los EE. UU.

En marzo de 2015, la Agencia Internacional para la Investigación sobre el Cáncer de la Organización Mundial de la Salud (OMS) clasificó al glifosato como "probablemente carcinogénico en humanos" (categoría 2A) según estudios epidemiológicos, en animales e in vitro. En noviembre de 2015, sin embargo,la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA, por sus siglas en inglés) publicó un informe que concluye que "es poco probable que el glifosato sea genotóxico o represente una amenaza carcinogénica para los humanos".

En medio de esta información contradictoria, en junio de 2016, la Comisión Europea no pudo ponerse de acuerdo sobre el nuevo registro del glifosato por otros 15 años. En cambio, otorgó una extensión de licencia temporal en espera de estudios científicos adicionales.

A medida que continúa el debate científico, crecen las preocupaciones de los consumidores sobre el glifosato en la cadena alimentaria. La EPA (40 CFR Parte 180) ha establecido tolerancias para diversos productos, cereales de grano: avena, trigo y cebada a 30 ppm o 30,000 ng / gm, pero los estándares orgánicos para algunos productos son tan bajos como 10 ppb (10 ng / g).

El análisis del glifosato en matrices ambientales a menudo es problemático porque es una molécula pequeña con similitud estructural con muchos materiales vegetales naturales, como los aminoácidos y los compuestos vegetales secundarios. Su alta solubilidad en agua hace que la extracción con solvente sea difícil, lo que representa un serio desafío para los químicos que necesitan eliminar los efectos de la matriz antes del análisis instrumental. Además, las matrices de plantas y suelos contienen co-contaminantes que aumentan la complejidad de la preparación de la muestra y hacen que el análisis instrumental sea más costoso y más costoso.

El inmunoensayo ligado a enzimas (ELISA, por sus siglas en inglés) es una técnica analítica que ha sido ampliamente utilizada durante décadas en una variedad de aplicaciones clínicas e industriales que van desde sangre, agua, micotoxinas, patógenos, etc., para proporcionar respuestas casi en tiempo real con respecto a las concentraciones de contaminantes en numerosos Matrices de muestra de manera oportuna, precisa y rentable.

Este estudio evalúa el kit de prueba ELISA de glifosato Eurofins Abraxis (Parte # 500086, ver Figura 2), un equipo de prueba ELISA disponible comercialmente para el análisis cuantitativo de glifosato, como un medio para obtener resultados de muestras en tres a cuatro horas para apoyar -Diseño de toma de decisiones para aplicaciones de pruebas agrícolas.

Reproducibilidad

Se obtuvieron doce muestras de trigo duro crudo con concentraciones desconocidas de glifosato para este estudio. Una submuestra de 0.5 g de cada muestra de trigo duro se molió y se extrajo en 10 ml de agua desionizada un total de tres veces de acuerdo con el protocolo descrito en el Boletín Técnico de Eurofins Abraxis, "Glifosato en Avena, Trigo y Cebada".

Los duplicados de todos los extractos de muestra, estándares y controles se derivaron y analizaron posteriormente según las instrucciones del kit de prueba en un solo lote de las placas ELISA de glifosato (número de pieza 500086) para un total de 72 determinaciones.

Solo se determinó que una muestra, # 5, tenía una concentración de glifosato por debajo de los límites de ensayo detectables (<7,5 ng / g). Se determinó que todas las demás muestras tenían concentraciones de glifosato que oscilaban entre 12 y 739 ng / g. El% CV entre los tres extractos para cada muestra varió de 2.3 por ciento a 27.4 por ciento. Solo una de las doce muestras mostró un% CV por encima del 20 por ciento en los tres extractos, lo que indica una excelente reproducibilidad del ensayo.

Los datos trazados entre dos análisis ELISA separados de extractos de muestras de trigo duro de la misma muestra de trigo crudo (ver Tabla 2), demostraron una excelente correlación entre sí como se indica en la Figura 3, el valor de r2 entre los dos análisis fue de 0.991.. 

Recuperación de picos

Los duplicados de extractos de muestra de trigo duro previamente determinado por ELISA con una concentración de glifosato por debajo de los límites de ensayo detectables (<7,5 ng / g) se enriquecieron con una cantidad conocida de glifosato (equivalente de 0,5 ng / g).

Los duplicados de otra muestra de trigo duro sin tratar previamente determinado con una concentración de glifosato equivalente a 21,5 ng / g por ELISA también se enriquecieron con 0,5 ng / g de glifosato. También se preparó un control de picos de 0,5 ng / ml con agua desionizada (LOQ en agua = 0,05 ng / ml) para evaluar los posibles efectos de la matriz en la recuperación de la muestra.

Todos los extractos de muestras enriquecidas, los controles de los picos de agua desionizada, los estándares y los controles se derivaron y analizaron posteriormente por duplicado, tal como se describe en el Boletín Técnico de Eurofins Abraxis, "Glyphosate in Oats, Wheat and Barley" y la Guía del usuario del kit de prueba de glifosato.

Como se indica en la Tabla 3, se determinó que la concentración media de los extractos enriquecidos era de 0.486 y 0.518 ng / gm respectivamente. Comparando la concentración de la muestra molida y extraída con la concentración enriquecida de 0.5 ng / g de glifosato equivalente, se determinó que la recuperación de la muestra fue de 97-103 por ciento.

Conclusiòn 

El kit de prueba ELISA para glifosato de Eurofins Abraxis es capaz de analizar muestras de trigo duro para determinar las concentraciones de glifosato. La evaluación de los kits de prueba para esta aplicación sugiere que los datos son reproducibles y precisos.

El% de CV fue inferior al 20 por ciento, en tres extractos de muestra de la misma muestra de trigo preparado y analizado por separado según las instrucciones del kit. La correlación entre las corridas de ELISA fue mayor que 0.990. Del mismo modo, el ensayo demostró una buena recuperación de muestras enriquecidas con un porcentaje de recuperación que oscila entre el 97 y el 103 por ciento.

AutorFernando Rubio, Lori fields y Thomas Glaze, Eurofins Abraxis, USA

Fuente: Milling nad Grain 

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